Система цифрового ПЦР QuantStudio 3D

Система цифрового ПЦР QuantStudio 3D предназначена для высокоточного количественного определения нуклеиновых кислот и является современным инструментом молекулярно-генетического анализа. В основе работы системы лежит высокоэффективная нанопроточная чип-технология, обеспечивающая высокую чувствительность, воспроизводимость и достоверность результатов. Благодаря применению цифровой ПЦР система позволяет осуществлять абсолютный подсчёт молекул без необходимости построения калибровочных кривых, что существенно повышает точность анализа по сравнению с классической количественной ПЦР (кПЦР).

Принцип цифрового ПЦР заключается в том, что реакционная смесь после добавления исследуемой ДНК или РНК равномерно распределяется на большое количество микрообъёмов, в каждом из которых происходит независимая амплификация целевого участка нуклеиновой кислоты. В системе QuantStudio 3D амплификация и последующая детекция продуктов ПЦР осуществляются в специализированном нанофлюидном чипе, содержащем около 20 000 изолированных ячеек. Каждая ячейка представляет собой автономный реакционный объём со своей собственной ПЦР-смесью, что позволяет проводить тысячи параллельных реакций в рамках одного эксперимента.

В результате распределения молекул часть ячеек содержит хотя бы одну целевую молекулу и после амплификации даёт положительный флуоресцентный сигнал, тогда как остальные ячейки остаются отрицательными. На основании статистического соотношения положительных и отрицательных реакций, с применением распределения Пуассона, рассчитывается точное исходное количество молекул в анализируемом образце. Такой подход обеспечивает высокую точность измерений даже при анализе образцов с крайне низкой концентрацией мишени или при наличии незначительных различий между исследуемыми последовательностями.

Благодаря высокой аналитической чувствительности и способности выявлять редкие события система QuantStudio 3D широко применяется в различных областях научных исследований и прикладной диагностики. Она идеально подходит для валидации молекулярных стандартов, используемых в классических экспериментах кПЦР, а также для получения эталонных образцов и референсных материалов. Система эффективно используется для определения титра патогенов, детекции редких мишеней, включая выявление соматических мутаций в онкологических исследованиях, анализа генной копийности и оценки вариаций числа копий генов. Кроме того, QuantStudio 3D применяется для выявления генетически модифицированных организмов, оценки уровня контаминации образцов и проведения высокоточных количественных исследований, требующих максимальной надёжности и воспроизводимости результатов.

Преимущества системы цифрового ПЦР QuantStudio 3D

• Простота рабочего процесса. Система QuantStudio 3D разработана с акцентом на удобство использования и экономию времени. Подготовка образцов сводится к минимуму — достаточно загрузить ДНК или РНК в микрофлюидный чип, после чего амплификация и детекция происходят автоматически. Это позволяет лабораторному персоналу заниматься другими задачами, пока система выполняет полный цикл эксперимента. Такой подход обеспечивает результаты «под ключ», исключая необходимость сложных промежуточных шагов и снижая риск ошибок оператора.
• Экономичность. Стоимость системы QuantStudio 3D более чем в два раза ниже по сравнению с аналогичными цифровыми ПЦР-платформами на рынке. Это делает передовую технологию цифровой ПЦР доступной для большинства лабораторий, включая небольшие исследовательские центры и образовательные учреждения. Экономия достигается как за счёт стоимости оборудования, так и за счёт снижения расхода реагентов и материалов при работе с микрочипами.
• Абсолютный количественный анализ. Система обеспечивает точный и воспроизводимый подсчёт молекул благодаря 20 000 изолированным ячейкам на чипе. Каждая реакция регистрируется отдельно, что позволяет определить концентрацию мишеней в копиях на микролитр с высокой точностью и чувствительностью. При этом отсутствует необходимость построения стандартной кривой, как в классической кПЦР, что упрощает анализ и повышает достоверность результатов, особенно при исследовании образцов с низкой концентрацией или редкими вариантами нуклеиновых кислот.
• Герметичная система. Все реакции происходят внутри герметичного нанофлюидного чипа, что минимизирует риск контаминации образцов. Отсутствие манипуляций с переносом реакций между сосудами и этапов открытия пробирок снижает вероятность случайного попадания посторонней ДНК в систему и обеспечивает надёжность данных даже при работе с высокочувствительными образцами.
• Компактность и мобильность. Прибор имеет небольшие размеры и легко помещается на любой лабораторной поверхности, не требуя отдельного специализированного помещения. Его можно свободно перемещать между рабочими зонами или переносить в другие лаборатории, что повышает гибкость использования оборудования в условиях ограниченного пространства.
• Совместимость с реагентами. QuantStudio 3D полностью совместима с уже имеющимися наборами реагентов TaqMan для кПЦР от Applied Biosystems. Это позволяет использовать привычные реактивы для получения цифровых данных без необходимости приобретать новые специфические наборы, экономя время на оптимизацию и снижая расходы на эксперименты.