Грипп и ПЦР анализ

Скорректирована длительность инкубационного периода. Теперь считается, что он длится максимум 4 дня, в среднем 48 часов. Раньше предполагали, что этот период может достигать 7 дней. Добавлены новые симптомы, которые характерны для гриппа H1N1, – проявления со стороны желудочно-кишечного тракта. К ним относятся тошнота, рвота, жидкий стул.

Выделена группы риска. В нее входят пациенты старше 65 лет, пациентки в 2-м и 3-м триместрах беременности, люди с хроническими заболеваниями – сердечно-легочной патологией, сахарным диабетом, почечной и печеночной недостаточностью, гемоглобинопатиями, иммунодефицитом; пациенты с расстройствами, приводящими к нарушениям обработки респираторных секретов, например, когнитивная дисфункция, нервно-мышечные и судорожные расстройства, инсульт. У пациентов из этих групп часто развиваются осложнения: острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС), первичная гриппозная или вторичная бактериальная пневмония.

Изменилась схема подтверждения диагноза гриппа. Неспецифическая лабораторная диагностика: всем пациентам с подозрением на грипп назначают клинический анализ крови и мочи. При неосложненном течении высока вероятность нормоцитоза или лейкопении, нейтропении, эозинопении, относительного лимфо- и моноцитоза. В общем анализе мочи патологических изменений чаще всего не наблюдается, при выраженной лихорадке возможны увеличение плотности мочи, лейкоцитурия, протеинурия, цилиндрурия.

Специфическая лабораторная диагностика: назначается молекулярно-биологическое исследование мазков со слизистой оболочки носо- и ротоглотки не только для определения РНК вирусов гриппа, но и других возбудителей. К ним относят вирус парагриппа, рино-, адено-, РС-, бока-, мета-, пневмо- и коронавирусы 229E, OC43, NL63, HKUI.

ПЦР-амплификаторы

Для анализа результатов ПЦР используют специальные ДНК-амплификаторы: «ДТпрайм» или «ДТлайт» производства ООО «НПО ДНК-Технология», CFX (BioRad, США), COBAS Amplicor (Roche, США), АВI PRISM (ABI, США), Rotor-Gene (Qiagen, GmbH, Германия), SmartCycler и GeneXpert® System (Cepheid, США) и другие, с оптическим блоком, позволяющие детектировать флуоресценцию внутри реакцион ной пробирки в ходе амплификации.

Оборудование для ПЦР открывает широкий спектр возможностей:

• мультплексный качественный и количественный анализ;

• ОТ-ПЦР для измерения малых количеств мРНК, в том числе с количествен ной оценкой содержания искомой мРНК, определение уровня экспрессии гена в отдельной клетке или ткани;

• технология плавления и другое.

Выбор модели прибора для проведения ПЦР с детекцией результатов
в режиме реального времени должен определяться:

• диагностическими (в медицинских учреждениях) или научными
  (в научно-исследовательских учреждениях) задачами;
  
• планируемым объемом исследований за единицу времени;
  
• режимом работы лаборатории (одна смена или более);
  
• необходимостью сочетать несколько вариантов технологий ПЦР-Реальном времени.