Определение белка в моче: пирогалловый метод и альтернативы

Определение белка в моче является важной частью лабораторной оценки состояния почек, течения беременности и ряда системных заболеваний. Повышенное содержание белка может быть ранним признаком поражения почечных клубочков, диабетической нефропатии, преэклампсии и других патологических состояний.

Для исследования используют несколько методик. Наиболее распространены тест-полоски, турбидиметрический метод с сульфосалициловой кислотой и количественный колориметрический метод с пирогалловым красным.

Какие методы используют для определения белка в моче

В лабораторной практике применяются следующие подходы:

• тест-полоски, или метод сухой химии;
• метод с сульфосалициловой кислотой;
• пирогалловый метод с пирогалловым красным;
• количественные иммунологические исследования отдельных белков, например альбумина.

Каждый метод имеет собственную аналитическую чувствительность, ограничения и область применения.

Метод сухой химии: преимущества и ограничения

Тест-полоски используются для быстрого первичного скрининга. Метод удобен в амбулаторной практике, при экспресс-исследованиях и самоконтроле, однако его возможности ограничены.

Реакция тест-полосок основана преимущественно на выявлении альбумина. Это означает, что метод может недостаточно эффективно определять другие белковые фракции.

Основные ограничения тест-полосок:

• невысокая чувствительность при малых концентрациях белка;
• риск недооценки выраженности протеинурии;
• ограниченное выявление неальбуминовых белков;
• отрицательный результат при наличии белка Бенс-Джонса;
• влияние pH, концентрации и цвета мочи на интерпретацию результата.

Поэтому тест-полоски подходят для ориентировочного скрининга, но при подозрении на патологическую протеинурию результат необходимо уточнять количественным методом.

Метод с сульфосалициловой кислотой

Турбидиметрический метод с сульфосалициловой кислотой основан на помутнении мочи при осаждении белка. В отечественной практике его также связывают с методом Брандберга-Робертса-Стольникова.

Метод может применяться для выявления общего белка, однако имеет ряд ограничений:

• чувствительность ниже, чем у современных количественных методик;
• результат зависит от мутности и окраски образца;
• на реакцию могут влиять лекарственные препараты и другие примеси;
• требуется большее количество биоматериала;
• метод сложнее автоматизировать.

При невысокой концентрации белка метод с сульфосалициловой кислотой может недооценивать выраженность протеинурии.

Пирогалловый метод с пирогалловым красным

Пирогалловый метод основан на взаимодействии белка с пирогалловым красным в кислой среде. Образующийся окрашенный комплекс определяют фотометрически.

Метод применяется для количественного определения общего белка в моче и может быть реализован на полуавтоматических и автоматических биохимических анализаторах.

Пирогалловый метод обладает высокой аналитической чувствительностью и позволяет выявлять низкие концентрации белка. Это особенно важно при раннем поражении почек, когда выраженная протеинурия еще не сформировалась.

Преимущества пирогаллового метода

По сравнению с тест-полосками и методом с сульфосалициловой кислотой пирогалловый метод имеет несколько практических преимуществ:

• количественное определение общего белка;
• более высокая чувствительность при низких концентрациях;
• меньшая зависимость от окраски и мутности мочи;
• возможность автоматизации;
• небольшой объем исследуемого образца;
• сокращение ручных этапов;
• удобство для поточной лабораторной диагностики.

Для выполнения исследования требуется небольшое количество мочи, что особенно удобно при работе с ограниченным объемом биоматериала.

Значение анализа при заболеваниях почек

Количественное определение белка в моче помогает выявлять и контролировать протеинурию при:

• диабетической нефропатии;
• хронической болезни почек;
• гломерулонефритах;
• артериальной гипертензии;
• системных аутоиммунных заболеваниях;
• инфекциях мочевыводящих путей;
• беременности.

При оценке функции почек анализ на общий белок в моче рекомендуется рассматривать вместе с альбуминурией, соотношением альбумин-креатинин, уровнем креатинина в крови, расчетной скоростью клубочковой фильтрации и данными общего анализа мочи.

Определение белка при беременности

Во время беременности контроль белка в моче имеет особое значение для оценки риска преэклампсии. Тест-полоски могут использоваться для первичного скрининга, однако при подозрительном или положительном результате необходима количественная оценка протеинурии.

Колориметрический метод с пирогалловым красным позволяет получить количественный результат и оценить выраженность белковых потерь более точно, чем ориентировочные методы.

Значение автоматизации

Автоматические биохимические анализаторы позволяют стандартизировать определение белка в моче, ускорить выдачу результатов и снизить влияние ручных этапов на точность исследования.

Пирогалловый метод удобно включать в потоковое лабораторное исследование вместе с определением креатинина, глюкозы, мочевины и других биохимических показателей.