Лабораторная диагностика онихомикоза

Преаналитический этап

Лабораторная диагностика онихомикоза включает применение основных микологических методов:

• микроскопическое исследование,
• культуральное исследование,
• молекулярно-биологические методы.

Согласно стандарту лечения больных онихомикозом в России (Приказ №747 от 11.12.2007 г. Министерства здравоохранения и социального развития РФ), диагностика требует только микроскопического исследования. Молекулярно-генетические методы находятся на этапе внедрения в микробиологическую практику.

Сбор материала

Участок ногтя для исследования определяется формой онихомикоза:

• При поверхностной форме берут соскобы с поверхности ногтевой пластины.
• При дистальной подногтевой форме – материал должен включать:
  • обрезок ногтевой пластинки,
  • соскоб с ногтевого ложа,
  • области на границе между пораженными и неизмененными участками.
• При проксимальной подногтевой форме забор материала сложнее, иногда проводится биопсия ногтя.
• При паронихиях делают соскобы с проксимального валика и из-под него.

Важно: чтобы избежать бактериальной контаминации, перед забором образца ноготь обрабатывают этиловым спиртом.

Микроскопическое исследование

Чаще всего используется раствор гидроксида калия (КОН). Для улучшения визуализации грибковых элементов добавляют флюорохром – калькофлюор белый, а препарат рассматривают в люминесцентном микроскопе.

Особенности метода:

• Позволяет определить грибковую природу инфекции, но не вид гриба-возбудителя.
• Возможны ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

Культуральное исследование

Материал высеивают на стандартную среду Сабуро, часто с добавками антибиотиков.

Особенности метода:

• Для диагностики дерматофитных инфекций в среду добавляют циклогексимид, подавляющий рост грибов-контаминантов.
• Некоторые виды плесневых грибов и Candida не растут на среде с циклогексимидом, поэтому проводят посев на среды с ним и без него.
• Идентификация видов проводится микроскопически или путем пересева на селективные среды.

Замечание: дерматофиты могут расти медленно – до 2–3 недель.

Даже при соблюдении всех правил число положительных результатов культурального исследования остается низким.